Bu bölüm bakteri üremesine ve su kalitesinin kültür ortamı üzerindeki etkisine odaklanmaktadır. Immunoassay ve PCR başka bir yerde tartışılmıştır.

Kültür tekniklerinin performansını etkileyen ana safsızlık türleri bakteriler, endotoksinler, organik bileşikler ve iyonik kirleticilerdir.

1. Bakteriler

Bakteriler, tipik hücre kültürü koşullarında gelişir ve ilgili hücreleri hızla aşarak besin seviyelerinin düşmesine ve toksik yan ürünlerin artmasına neden olabilir. Bakteriyel kontaminasyon, ortam pH'ında ani değişikliklere ve önceden saf kültürlerin kontaminasyonuna da yol açabilir.

2. Endotoksinler

Endotoksinler çoğu Gram-negatif bakteri tarafından salınır. Bu endotoksinler, CD14 endotoksin reseptörlerinden yoksun olanlar da dahil olmak üzere çeşitli hücre tiplerini etkiler ve çeşitli pro-inflamatuarsitokinleri salmak için makrofajları ve mononükleer fagositleri uyarır. Ortaya çıkan olumsuz etkiler, hücre büyümesi ve fonksiyonundaki değişiklikleri, rekombinant proteinlerin üretimini ve klonlamanın verimliliğinde bir azalmayı içerir.

3. Organik bileşikler

Suda yaygın olarak bulunan organik bileşikler - hümik asitler, tanenler, böcek ilaçları ve endokrin bozucular gibi - hücre gelişimini etkileyebilir. Bakteriyel büyüme için kontrolsüz bir besin kaynağı sağlarlar ve hücre kültürü için materyal hazırlamak için kullanılan sudan çıkarılmalıdırlar. Organik bileşikler, iz HPLC ve GC analizleri ile zayıf tespit limitleri ve azalmış tekrarlanabilirlik gibi sorunlara da neden olabilir.

4. İyonlar

İyonik kirleticiler, özellikle çok değerlikli iyonlar ve ağır metaller düşük tutulmalıdır. Ağır metaller - örneğin cıva ve kurşun - çeşitli hücre türleri için sitotoksik olduğu bilinmektedir.

5. Klor ve Amonyak

Su, mikrobiyal büyümeyi etkileyebilecek düşük seviyelerde klor ve amonyak içermelidir.