Hücre kültürü, bir süspansiyon veya bir yapışkan (tek tabakalı) kültür olarak, seçilen hücre tipi için özel olarak seçilen ortamda büyüyen hücreleri içerir. Tipik olarak ortam, amino asitler, glikoz, vitaminler, inorganik tuzlar ve lipitler gibi bileşikler içerecektir. Ayrıca hayvan serumu, büyüme faktörleri, hormonlar, antibiyotikler ve antioksidanlar içerebilirler. Buzağı serumu gibi diğer bileşenlerle desteklenebilen serum bazlı, serumsuz, hayvansız, proteinsiz ve kimyasal olarak tanımlanmış seçenekler dahil olmak üzere çeşitli ortam türleri mevcuttur. Hücreler daha sonra sıcaklık, oksijen ve karbondioksit içeriği gibi optimum hücre büyüme koşullarının korunmasını sağlamak için bir inkübatörde kültürlenir.

Kültürlenmiş hücreler, sağlıklı büyümeyi sürdürmek için sürekli bir besin kaynağına ihtiyaç duyar ve bu nedenle besiyerinin düzenli olarak yenilenmesi gerekir. Ek olarak, yapışan hücre çizgilerinin, sürekli büyümeyi sağlamak için mevcut yüzey alanının tamamen kaplandığı nokta olan birleşme noktasına ulaştıklarında alt kültürlenmesi gerekir. Hem ortam değişimi hem de alt kültürleme sırasında kültürün kimyasal veya biyolojik herhangi bir kontaminasyonunu önlemek çok önemlidir.